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      【匯總】微生物實驗室消毒處理方法!

      放大字體  縮小字體 發布日期:2021-10-11  瀏覽次數:105
      核心提示:一、無菌室1.紫外線消毒①在室溫20℃~25℃時,220V 30W紫外燈下方垂直位置1.0m處的253.7mm紫外線輻射強度應70uW/cm2,低于此值時應
       一、無菌室

       

      1.紫外線消毒

      ①在室溫20℃~25℃時,220V 30W紫外燈下方垂直位置1.0m處的253.7mm紫外線輻射強度應≥70uW/cm2,低于此值時應更換。適當數量的紫外燈,確保平均每立方米應不少于1.5W。

      ②紫外線消毒時,無菌室內應保持清潔干燥。

      ③在無人條件下,可采取紫外線消毒,作用時間應≥30min。室內溫度<20℃或>40℃、相對濕度大于60%時,應適當延長照射時間。

      ④用紫外線消毒物品表面時,應使照射表面受到紫外線的直接照射,且應達到足夠的照射劑量。

      ⑤人員在關閉紫外燈至少30min后方可入內作業。

      ⑥按照GB15981的規定,評價紫外線的消毒與殺菌效果。

       

      2.臭氧消毒

      ①封閉無菌室內,無人條件下,采用20mg/m3濃度的臭氧,作用時間應≥30min。消毒后室內臭氧濃度≤0.2mg/m3時方可入內作業。

      ②按照GB/T18202的規定,檢測室內臭氧的濃度。

       

      3.無菌室空氣滅菌效果驗證方法(沉降法)

      ①在消毒處理后與開展檢驗活動之前期間采樣。

      ②取樣位點的選擇應基于人員流量情況和做試驗的頻率。一般情況下,無菌室面積≤30m2時,從所設定的一條對角線上選取3點,即中心1點、兩端各距墻1m處各取1點;無菌室面積≥30m2時,選取東、南、西、北、中5點,其中東點、南點、西點、北點均距端1m。

      ③在所選位點,將平板計數瓊脂平板(90mm)或水化3 M Petrifilm菌落總數測試片置于距地面80cm處,開蓋暴露15min,然后,置于36℃士1℃恒溫箱培養48h土1h。如果偵查某目標細菌,則可用選擇性瓊脂平板(如PDA平板)或微生物測試片(如3 M Petrifilm環境李斯特氏菌測試片)。

      ④確認平板上的菌落數,如大于所設定的風險值,應分析原因,并采取適當措施。

       

      二、培養基和試劑


       

      1.培養基通常應采用高壓濕熱滅菌法,121℃滅15min,特殊培養基按使用者的特殊要求進行滅菌(如含糖培養基,115℃滅菌20min)。

       

      2.部分培養基(如嗜鹽瓊脂培養基、膽硫乳培養基等),只能煮沸滅菌。

       

      3.對熱敏感的培養基或添加物質,應采用膜過濾方法進行過濾除菌。

       

      4.即用型試劑不需滅菌,應參見相關國際標準或供應商使用說明,直接使用。

       

      三、器具和設備


       

      1.濕熱滅菌:采用高壓滅器,121℃滅菌20min,適用于玻璃器皿、移液器吸頭、塑料瓶等,按照GB15981的規定,評價高壓滅菌器的殺菌效果。

       

      2.干熱滅菌:采用干燥箱滅菌,160℃滅菌2h,180℃滅菌1h,適用于玻璃器皿,不銹鍋器具等。

       

      3.液體消毒劑消毒:使用適當濃度的自配或商業液體消毒劑(參見表D.1)對工作臺面、器具或設備表面進行消毒?砂凑誈B15981的規定,評價自配或商業消毒劑的消毒效果可按照ISO18593,監測工作臺面、器具或設備表面的消毒效果。

       

       表D.1

       

       

      四、實驗室廢棄物


       

      1.對于培養物及其污染的物品(如斜面、api20E測試條、api20NE測試條、生物鑒定管、血清學鑒定用載玻片、mini- VIDAS測試條、用過的移液器吸頭、細菌培養平皿、注射器等),應使用適當濃度的自配或商業液體消毒劑(參見表D.1)對處理后一定時間,或121℃高壓滅菌至少30min,或者其他有效處理措施。將處理物倒入特殊標識的垃圾袋內,直接送到指定地點。

      2.對于實驗動物尸體及相關廢棄物,按照GB14925的規定進行處理。

      3.記錄并保留廢棄物和實驗動物尸體處理的記錄。

       

      編輯:songjiajie2010

       
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